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dna連接酶與dna聚合酶的區別?
形成方式不同
dna連接酶是在兩個dna部分片段之間形成*二酯鍵,*化酶,不是在單個核苷酸與dna部分片段之間形成*二酯鍵。dna連接酶都不能催化兩條游離的dna鏈相連接。
dna聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的dna1片段上,形成*二酯鍵。dna聚合酶起到催化劑的作用,催化原來的dna進行復1制,然后將原來的dna和復1制以后的dna進行模板配對后,連接聚合在一起,就可以形成新的dna鏈。
所有合成cdna條鏈的方法都要用依賴于rna的dna聚合酶(反轉錄酶)來催化反應,主要有兩個關鍵因素,一個是mrna模板,另一個是反轉錄酶 。商品化反轉錄酶有從禽類成髓細胞瘤病毒純化到的禽類成髓細胞病毒(amv)逆轉錄酶和從表達化的moloney鼠病毒反轉錄酶*的大腸中分離到的鼠病毒(mlv)反轉錄酶。amv反轉錄酶包括2個具有若干種酶活性的多肽亞基,這些活性包括依賴于rna的dna合成,依賴于dna的dna合成以及對dna-rna雜交體的rna部分進行內切降解(rna酶h活性)。mlv反轉錄酶只有單個多肽亞基,兼備依賴于rna和依賴于dna的dna合成活性,但降解dna—rna雜交體中的rna的能力較弱。且其熱穩定性較amv反轉錄酶差。mlv反轉錄酶能合成較長的edna(如大于2~3kb)。amv反轉錄酶和mi。v反轉錄酶利用rna模板合成cdna時的適ph、適鹽濃度和適溫度各不相同.所以合成鏈時相應調整條件是非常重要的。
dna連接酶與dna聚合酶用途不同
dna連接酶主要用于*工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“*針線”。如*工程中,大腸桿1菌連接酶連接黏性末端,t4連接酶既可連接黏性末端,又可連接平末端。
dna聚合酶在dna copy中起做用,主要是連接dna部分片段與單個脫氧核苷酸之間的*二酯鍵。
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